操作步驟如下：
 
1.液體石蠟的準備
選用優(yōu)良化學純液體石蠟，將液體石蠟分裝加塞，用牛皮紙包好，采用以下兩種方式進行滅菌：
121℃濕熱滅菌30min，置40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，經(jīng)無菌檢查后備用。
160℃干熱滅菌2個小時，冷卻后，經(jīng)無菌檢查后備用。
 
2.斜面培養(yǎng)物的制備
參照定期移植法。
 
3.灌注石蠟
將無菌的液體石蠟在無菌條件下注入培養(yǎng)好的新鮮斜面培養(yǎng)物上，液面高出斜面頂部1cm左右，使菌體與空氣隔絕。
 
4.保藏
①注入液體石蠟的菌種斜面以直立狀態(tài)置低溫（4～6℃）干燥處保藏，保藏時間2～10年。
②保藏期間應(yīng)定期檢查，如培養(yǎng)基露出液面，應(yīng)及時補充無菌的液體石蠟。
 
5.恢復培養(yǎng)
恢復培養(yǎng)時，挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉(zhuǎn)接一次。